基因枪介导的转 TaGAPDH8基因小麦的获得与鉴定

甘油醛-3-磷酸脱氢酶（glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase，GAPDH）是参与糖酵解和糖异生途径的关键酶之一，在维持细胞能量供应和植物抗逆性方面具有重要作用。本研究以耐旱型小麦品种长武134及干旱敏感型小麦品种郑引1号为材料，利用基因枪法将 TaGAPDH8基因分别转化这两种小麦的幼胚愈伤组织，经潮霉素筛选和PCR鉴定，最终得到4个下调表达的长武134株系(CW134-3、CW134-6、CW134-12、CW134-13) 和8个上调表达的郑引1号株系(ZY1-1、ZY1-3、ZY1-4、ZY1-9、ZY1-10、ZY1-14、ZY1-15、ZY1-17) 。对生长于大田的T2代转基因植株在乳熟期的生长状况进行了测定，获得了与对照相比有明显表型差异的植株。用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）技术测定了T3代小麦株系中 TaGAPDH8的表达量，结果表明，4个长武134株系中 TaGAPDH8基因的表达量分别为对照的0.53、0.75、0.21和0.78倍，而8个郑引1号株系中目的基因的表达量分别为对照的3.02、1.22、2.15、1.36、4.02、1.87、1.48和1.97倍。本研究获得了与对照存在明显表型差异的T2代及稳定遗传目的基因的T3代小麦株系，为后续的试验提供了研究材料和基础。