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中国生物工程杂志 2008
2.4—d、6—ba对人参体细胞胚胎发生过程的影响研究Abstract: 本实验以人参芽胞、二年生人参根、实生苗的茎、叶为外植体研究了体细胞胚的发生条件,并对其发生过程中可溶性蛋白、相关酶活性及内源激素的变化等进行了研究。结果表明,诱导愈伤组织的培养基为ms+2,4-d4.0mg/l+ba0.2mg/l;在ms+2,4-d1.0mg/l+kt0.2mg/l培养基上继代培养,可获得胚性愈伤组织;在无2,4-d的培养基上可诱导出胚状体。将胚状体转入无任何激素的ms培养基上继续培养,之后转入1/2ms培养基上获得再生植株。组织细胞学观察表明人参胚状体的起源方式为单细胞起源。在体细胞胚胎发生过程中,多糖和淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、pod及ppo活性在早期胚时最高;iaa在早期胚时期含量最高,在成熟胚时期aba含量最高,而aba/iaa比值在成熟胚时较高,利于体细胞胚的发育成熟。cdna-aflp分析表明胚状体发育不同时期的人参培养物基因表达不同,从而导致了分化和发育。培养物hplc分析表明胚胎发生试管苗总皂苷含量比子叶胚时期高4倍多。单体皂苷差异较大。
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