水稻高叶绿素含量基因det1cdna的克隆、生物信息学分析及超表达载体的构建

提高水稻叶片中叶绿素含量可以提高光合作用效率。以水稻高叶绿素含量突变体为材料，在前期精细定位的基础上，克隆了高叶绿素含量基因det1（de-etiolated1）cdna。测序结果显示：det1基因全长cdna为1536bp，由11个外显子组成，编码512个氨基酸。与野生型珍汕97b相比，det1基因在第7个外显子上有t-c的转换，该转换引入了一个ecori酶切位点，并导致第328位的亮氨酸（l）改变为丝氨酸（s），且突变位点处于高度保守区域内。det1基因的氨基酸序列与玉米等其它高等植物的氨基酸序列同源性高达62%以上。利用生物信息学方法对det1基因的序列、进化树、理化性质及亲疏水性等进行分析，并构建了水稻超表达载体pcuphn-det1，为水稻高叶绿素含量突变基因det1的功能验证奠定基础。