重组萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶在毕赤酵母优化表达初步纯化与鉴定

将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶（rsphgpx）基因插入到分泌表达载体ppic9k中，转化巴斯德毕赤酵母gs115细胞，筛选具有g418抗性的单拷贝转化子。经过优化表达条件，rsphgpx在1%甲醇、ph6.0、28℃条件下诱导60h后得到最大表达量，产率约为102mg/l。通过硫酸铵分级沉淀、脱盐柱脱盐、凝胶过滤等纯化步骤，得到了90%以上纯度的rsphgpx．活性分析显示纯化获得的rsphgpx具有依赖于gsh的还原活性,比活性为4.2μmol/min·mg，为获得大量rsphgpx而用于应用开发研究奠定了基础。