狐源犬瘟热病毒cdv-fox-ta株核蛋白基因的原核表达及鉴定

应用rt-pcr技术扩增出犬瘟热病毒(cdv)核衣壳(n)蛋白基因抗原性好的高保守基因片段，将其ta克隆至pmd18-t载体中，再利用酶切、连接的方法将测序正确的n基因目的片段亚克隆到原核表达载体pet24b中6×histag编码基因的上游，并将该重组质粒转化大肠杆菌rosetta2(de3)株，经iptg诱导，n基因融合蛋白获得了高效表达。sds-page分析和westernblot分析的结果显示，表达产物的分子质量为15kd，与cdv标准阳性血清呈阳性反应，间接elisa结果也表明重组表达产物具有良好的抗原性，能够有效区分cdv标准阳性与阴性血清，表明大肠杆菌表达的cdvn蛋白在免疫原性上具有与天然n蛋白同样的特性，可作为检测cdv的间接elisa包被抗原。