抗aids新型导向毒素cvn-lp1融合基因的构建及原核表达

目的：构建重组抗病毒融合蛋白cvn-lp1原核表达载体，并进行表达和鉴定。方法：将本室已经构建好的pet-cvn和pet-lp1，用ecorⅰ和hindⅲ同时进行双酶切，将所得的cvn片段连入pet-lp1载体上，构建pet-cvn-lp1表达载体，转入大肠杆菌bl21(de3)，iptg诱导表达。用sds-page，western-blot等方法分析鉴定表达产物。结果：重组载体pet-cvn-lp1经pcr和双酶切鉴定，证实构建成功。将其导入大肠杆菌bl21(de3)中表达，表达产物相对分子量为20kd左右，与理论预期值完全相符。凝胶成像分析表明最高表达量可占菌体总蛋白的16.86%。sds-page、western-blot分析表明目的蛋白得到了很好的表达。结论：构建了pet-cvn-lp1原核表达载体，并成功地获得表达，为进一步研究其生物学功能奠定了坚实的基础。