利用双向电泳技术分离大豆矮秆突变体相关蛋白

矮秆是大豆育种的重要目标性状之一。本实验以大豆野生型东农42和矮秆突变体东泽11为材料，利用近年来发展起来的双向电泳技术，在蛋白质水平对两个材料的差异蛋白质进行筛选，目的是鉴定与矮秆突变体相关的蛋白，为基因克隆提供依据。通过对酚(phenol)法与tca／丙酮沉淀法二种提取方法、100μg和200μg两种加样量、考马斯亮蓝染色和银染两种染色方法的比较，发现用丙酮沉淀法提取叶片可溶性总蛋白、加样量为200μg进行电泳，用考马斯亮蓝染色的效果较好，从而建立了大豆叶片总蛋白双向电泳技术优化体系。用该体系对野生型与突变体叶片全蛋白的差异分析，鉴定出９个蛋白差异点，其中６个上调表达，３个下调表达。