人fbxo31蛋白的原核表达及抗体制备

[摘要]fbxo31位于人染色人体16q24.3，是一个乳腺癌候选抑癌基因。为了获得抗fbxo31的多克隆抗体，构建了fbxo31基因的原核表达质粒pet-28a-fbxo31。将表达pet-28a-fbxo31转入大肠杆菌bl21（de3）菌株中，iptg诱导表达融合蛋白。融合蛋白主要以包涵体形式存在，常规方法纯化包涵体。将纯化的pet-28a-fbxo31融合蛋白用于免疫新西兰大白兔获得抗血清，用pet-28a-fbxo31对抗血清进行分离纯化，得到抗fbxo31多克隆抗体。用western印迹和免疫沉淀对其进行初步鉴定。获得了兔抗人fbxo31的多克隆抗体，为进一步研究fbxo31的生物功能提供了有用的工具。