禽流感病毒h9n2血凝素基因和神经氨酸酶因在真核酵母菌中的表达

目的克隆、表达和鉴定禽流感病毒h9n2血凝素基因（hemagglutinin，ha）和神经氨酸酶基因（neuramidinase，na）序列，为制备抗体和基因工程疫苗打下基础。方法在成功克隆禽流感病毒h9n2全长ha、na基因并测序的基础上，将部分基因序列克隆到表达载体pmeta上，构建了重组表达质粒pmeta/ha(52bp-1545bp)，pmeta/na(121bp-1254bp)，电转化真核酵母菌pmad16，甲醇诱导表达，利用ni2＋亲和层析柱对重组蛋白进行纯化，并用westernblotting和elisa方法检测其抗原性。结果重组蛋白在酵母菌中可以高效表达，sds-page显示蛋白表达后形成了二聚体，蛋白纯度占总蛋白的95％以上，elisa和westernblotting实验证实，重组蛋白具有良好的抗原性。结论本研究成功克隆和表达了禽流感病毒h9n2ha、na基因序列，为禽流感病毒h9n2诊断试剂和疫苗的开发等进一步的研究奠定了基础。