阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的基因克隆及重组酶性质分析

为研究重组阴道毛滴虫蛋氨酸裂解酶的活性，从阴道毛滴虫提取rna，经过rt-pcr克隆蛋氨酸γ-裂解酶基因，与pet-15b质粒连接构建原核表达载体pet-15b-mgl1，并测序。转化宿主菌bl21后进行诱导表达，分离纯化目的蛋白并研究其酶学性质。以l-蛋氨酸、dl-同型半胱氨酸、l-半胱氨酸为底物测定重组酶km值为0.318、2.14、1.62mmol/l，比活性分别为20.17、318.69、56.96μmol/min/mgprotein。mgl最适ph在5.0到6.0之间，在50℃可稳定30min无活性损失。实验结果显示重组酶具有较高的活性和较好的热稳定性，为临床应用研究奠定基础。