γ-谷氨酰基转肽酶（ggt）基因工程菌的构建及其发酵条件的初步研究

利用pcr技术以bacillussubtilissyu20016基因组dna为模板，扩增出1.8kb编码γ-谷氨酰基转肽酶的基因ggt，将其连接到温控表达载体pbv220，得到重组载体pbv220-ggt，重组载体在大肠杆菌jm109中得到表达。sds-page分析显示融合表达产物的分子量大小为65kd，同核酸序列测定所推导的值相符。对含有ggt的基因工程菌进行表达研究表明：发酵的培养温度为30℃，ph为7.2，装液量为20ml(在250ml的锥形瓶中)的条件下42℃诱导4h后，重组菌的γ-谷氨酰基转肽酶酶活力达到6u/ml，目前报道的非基因工程菌（枯草芽孢杆菌nx-2）酶活力最高仅为3.2u/ml。