人il-6/sil-6r结合分子模型的建立及在药物筛选中的应用

目的：建立人il-6/sil-6r结合的分子模型，用于筛选il-6/sil-6r的抑制剂。方法：将人il-6基因克隆至原核表达载体pet28a（+）中表达il-6蛋白，westernblot及人il-6检测试剂盒分析鉴定表达蛋白。同法将人sil-6r在pet15b载体中表达，纯化并用westernblot检测目的蛋白。依据elisa原理建立il-6/sil-6r结合的分子模型，并通过改变il-6、sil-6r及il-6antibody的浓度来优化该模型，用于il-6/sil-6r拮抗药物的筛选。结果：人il-6可在载体pet28a（+）中高效表达，且经westernblot鉴定正确，人il-6检测试剂盒检测显示具有较高的免疫活性。sil-6r在pet15b中表达，westernblot鉴定正确。通过对il-6/sil-6r结合的分子模型的优化，得到其最佳条件为：il-6r1?g/well,il-6500ng/well,il-6antibody1?g/well。应用该模型筛选发现有些化合物可显著抑制il-6与其受体的结合。结论：成功构建il-6/sil-6r结合的分子模型，为高通量筛选il-6拮抗剂提供平台。