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ISSN: 2333-9721
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dek蛋白c末端dna结合域的原核表达、纯化及其与dna的结合活性

Keywords: dek蛋白,c末端dna结合域,原核表达,纯化,凝胶迁移实验

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Abstract:

dek蛋白c末端dna结合域(简称cdb)是近年新发现的一个dek蛋白与dna的结合域,其中含有多个磷酸化位点,与dek蛋白的功能密切相关。利用原核表达系统表达dek蛋白的cdb肽段并进行纯化,具体为以pet30a(+)为载体质粒,e.colibl21(de3)为宿主细胞,构建重组基因工程菌,以iptg诱导目的蛋白的表达,用ninta纯化的重组蛋白样品来进行sdspage电泳分析,约在10.7kda处出现明显的特征蛋白条带。凝胶迁移分析证实dek蛋白c末端dna结合域与dna的结合倾向于与超螺旋型dna相结合,同全长的dek蛋白与dna的结合具有类似的特点,表明dek蛋白c末端dna结合域在dek蛋白与dna的结合中可能具有一定的作用。

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