一种新型的截短型转化生长因子βⅱ型受体在大肠杆菌中的表达及活性鉴定

克隆人源的截短型转化生长因子βⅱ型受体（ttgf-βrⅱ），成功构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株。采用pcr技术扩增得到目的基因ttgf-βrⅱ，插入原核表达载体pgex4t3的相应位点，并在大肠杆菌bl21（de3）中获得高可溶性表达的重组蛋白，重组蛋白gst-ttgf-βrⅱ经glutathione-sepharose4b亲和层析纯化后，再经凝血酶酶切，然后经glutathione-sepharose4b纯化获得目的蛋白ttgf-βrⅱ，sds-page分析表明：可以通过glutathione-sepharose4b亲和层析纯化得到gst-ttgf-βrⅱ，其分子量约37.0kda，和目的蛋白ttgf-βrⅱ，分子量为11.0kda。westernblot结果显示gst-ttgf-βrⅱ和ttgf-βrⅱ为特异性蛋白。运用基因工程的方法获得ttgf-βrⅱ目的蛋白，对瘢痕成纤维细胞增殖具有很好抑制作用。