铜绿假单胞菌sos反应阻遏蛋白lexa的复性及活性研究

目的:对lexa蛋白复性方法进行优化，对复性后的lexa蛋白的生物学活性进行分析。方法:采用含有gsh/gssg的缓冲液，一步稀释法对变性lexa蛋白进行复性，用镍离子亲合柱及阳离子柱层析法对复性后的lexa蛋白进行纯化，再以sephadexg-25凝胶柱脱盐，采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和rp-hplc法检测复性效果，westernblot法分析复性前后及经dtt处理后的lexa蛋白的免疫反应性，凝胶滞留电泳试验检测复性lexa蛋白与dna的特异性结合能力。结果:复性后的lexa蛋白出现单体和多聚体的形式，多聚体是由单条肽链聚合而成。lexa单体和多聚体与兔抗lexa多克隆抗体均有较好的反应性。复性后的lexa蛋白能与sos盒序列发生特异性结合。