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ISSN: 2333-9721
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一种改良的ctab法提取产多糖真菌dna

Keywords: ctab,dna提取,多糖去除

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Abstract:

真菌胞外多糖由于其高吸附高粘稠特点,是困扰从胞外多糖产生菌分离高纯度dna的难点之一。本文以生产硬葡聚糖的齐整小核菌生产菌为代表,采用改良的ctab法获得了高质量的基因组dna。通过分层隔离等培养方法的优化降低硬葡聚糖的产生,并在传统ctab法的基础上,用高浓度的醋酸钾和无水乙醇共同作用初步沉淀多糖,再用ctab/nacl溶液再次去除多糖。相比于商业的dna提取试剂盒和传统的ctab法,该方法得到的基因组dna产率大幅提高,纯度较好,可充分排除胞外多糖的干扰,为各典型产胞外多糖的真菌dna提取提供重要的参考。提取的基因组dna可用于基因组文库构建、pcr等分子生物学实验。

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