利用bglbrick方法进行hsa/exendin-4长效融合蛋白的快速组装

目的：通过合成生物学的bglbrick方法快速构建不同种类hsa/exendin-4长效融合蛋白，为进行各hsa/exendin-4融合蛋白生物学活性的筛选比较奠定基础。方法：选用酵母表达载体ppiczαa质粒，构建ppiczαa-e4和ppiczαa-hsa两种基础brick表达载体，运用bglbrick方法，实现了不同数目exendin-4分子在hsa的不同末端的快速组装。将构建出的10种hsa/exendin-4融合蛋白，转入毕赤酵母菌km71h中，用甲醇诱导目的蛋白的表达。结果：用bglbrick方法构建的hsa/exendin-4融合蛋白在毕赤酵母中都成功诱导表达出相应的目的蛋白。结论：利用bglbrick方法能够实现hsa长效融合蛋白的快速组装。