ⅰ型单纯疱疹病毒gd基因片段的高效表达及抗原性分析

目的获得高表达的ⅰ型单纯疱疹病毒(hsv)被膜糖蛋白gd（简称gd1）基因的工程菌。方法通过计算机分析，筛选出疱疹病毒gd1中优势抗原决定簇的基因片段。将克隆的基因片段插入表达载体ptrxa内,转化大肠杆菌rosetta，以异丙基-β-d-硫代半乳糖苷诱导表达。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)分析表达产物。　结果　pcr扩增出约930bp的gd1编码基因目的片段,与预期片段大小相符,经测序鉴定无基因突变;所构建ptrxa-gd1重组表达质粒阳性克隆经pcr与双酶切鉴定,与预期结果一致;含有ptrxa-gd1重组质粒的大肠杆菌rosetta诱导后得到了高效达,sds-page显示表达产物约mr48000（dalton）。免疫印迹结果表明表达产物具有较好的抗原性。结论　成功构建了ptrxa-gd1表达质粒,实现了成熟gd1蛋白在大肠杆菌中的高效表达,表达产物具有好的抗原性。