传染性法氏囊病病毒非结构蛋白vp5的原核表达及多克隆抗体的制备

利用pcr技术,从传染性法氏囊病病毒（ibdv）gx，gt毒株中分别扩增出vp5基因,将其克隆到表达载体pet30a、pet28a中。经pcr、酶切和序列分析鉴定获得重组质粒命名为pet28a-gtvp5、pet30a-gxvp5。将pet30a-gxvp5、pet28a-gtvp5分别转化宿主菌bl21(de3)，在iptg诱导下均成功表达约24kda的gx-vp5及23kda的gt-vp5融合蛋白，并都以包涵体形式存在。将gx-vp5纯化后的蛋白免疫8周龄balb/c雌鼠，elisa分析表明制备的抗血清效价在1:25600以上，westernblot分析vp5表达产物能与抗6×hismab及抗ibdv多克隆抗血清发生反应，具有良好的免疫反应特异性。