紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞作用的研究

？目的：观察紫杉醇对3种不同p53基因型肺癌细胞的作用。方法：以不同浓度紫杉醇(0.1、1.0、10、100、1000nmol/l)分别作用肺癌细胞a549、h322、h1299不同时间(4、12、24、48、96h)，实验同时设阴性对照组(不加紫杉醇)和空白对照组(只加细胞培养液)。采用mtt、流式细胞术、westernblotting检测细胞的生长及细胞周期、凋亡、乙酰化微管蛋白、p53蛋白等指标变化。结果：紫杉醇对3株肺癌细胞的生长抑制作用均随着作用时间的延长而增强(p＜0.05)；不同浓度紫杉醇对3株细胞生长的影响也存在差异(p＜0.05)。3株细胞中a549细胞半数抑制浓度相对较低，但3株细胞间对紫杉醇敏感性的差异无统计学意义(p＞0.05)。紫杉醇10nmol/l作用时，3株细胞g2/m期变化趋势基本一致，1000nmol/l作用时，a549细胞g2/m期比例与作用时间呈正相关(p＜0.05)，h322和h1299的g2/m细胞于24h达高峰，作用后期h1299出现异常多倍体；同浓度紫杉醇作用的各株肺癌细胞的凋亡呈时间依赖性，但1000nmol/l组诱导的细胞凋亡比10nmol/l组更晚出现。浓度依赖性实验中，10nmol/l诱导凋亡比例最高；紫杉醇浓度≤100nmol/l时，g2/m期比例随浓度增加而增高(p＜0.05)；紫杉醇浓度≥100nmol/l时，各肺癌细胞株g2/m期比例间的差异无统计学意义。凋亡和g2/m期阻滞无相关性(p＞0.05)。紫杉醇作用后，a549细胞p53蛋白呈浓度和时间依赖性增加，h322细胞p53蛋白无明显变化。3株细胞乙酰化微管蛋白均较对照组显著上升(p＜0.05)。结论：紫杉醇对不同p53基因型肺癌细胞生长的抑制作用呈时间依赖性。紫杉醇可增加野生型p53蛋白表达，诱导p53依赖和非p53依赖的两种凋亡途径，p53基因型影响了高浓度紫杉醇对肺癌细胞的周期阻滞作用，但对紫杉醇化疗敏感性无显著影响。