真核表达载体pcdna3.1(+)-myod-ha-his的构建及功能检测

为了便于检测和纯化转染到非肌肉细胞的生肌因子myod，同时为能够与转染的其他生肌因子的表达量进行比较，将myod编码区克隆在真核表达载体pcdna3.1（+）-ha-his。测序表明克隆的myod序列正确，并与标签序列构成一个开放阅读框；westernblot显示在起始密码子前添加kozak序列gccgccacc，可使融合蛋白能够以较高水平表达；生肌转化实验表明，融合蛋白myod-ha能够有效激活靶基因的表达。