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ISSN: 2333-9721
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mir-143在鼻咽癌细胞系中的表达及其对高转移细胞株5-8f的影响

Keywords: mir-143,鼻咽癌,逆转录病毒,稳定细胞系,黏附

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Abstract:

目的检测鼻咽癌细胞系中mir-143表达情况,建立稳定高表达mir-143的鼻咽癌细胞系,为研究其在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制提供可靠的细胞模型。方法采用qpcr方法检测鼻咽癌细胞系cen1、cne2、hone1、5-8f、6-10b及人永生化鼻咽上皮细胞np69中mir-143的表达水平。构建重组逆转录病毒质粒pmscv-puro-mir-143,包装逆转录病毒pmscv-mir-143和pmscv-vector并感染鼻咽癌细胞,建立稳定高表达mir-143的鼻咽癌细胞系,并应用细胞黏附实验检测过表达mir-143后,鼻咽癌细胞对胞外基质的黏附性。结果鼻咽癌细胞系中mir-143的表达水平均低于对照组np69细胞,其中高转移潜能细胞株5-8f的表达量最低,仅为对照组的3.03%,成瘤但不转移细胞株6-10b表达量最高,为对照组的63.59%。实时荧光定量pcr显示筛选后第7代细胞mir-143的表达水平比对照组高出达1080倍(p<0.05)。细胞黏附实验结果显示,过表达mir-143可降低5-8f细胞对胞外基质的黏附性。结论mir-143在鼻咽癌细胞系中表达失常,其作用可能与鼻咽癌细胞的侵袭和转移相关;成功建立了稳定高表达mir-143的鼻咽癌细胞系,并初步确定mir-143能抑制5-8f细胞的黏附能力,为探索mir-143在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制奠定了实验基础。

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