鬼臼毒素纳米脂质载体的制备及体外对hpv感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用

摘要：目的研究鬼臼毒素纳米脂质载体(pod-nlc)的体外对hpv感染的永生化人宫颈上皮细胞的作用。方法采用乳化蒸发法制备pod-nlc，分别应用扫描电镜、粒径仪、高效液相法等方法研究其表征，并观察其稳定性。分别以不同浓度(0.0001~1μg/ml)的pod-nlc和鬼臼毒素(pod)处理h8细胞，采用mtt法检测细胞的增殖活性，以荧光显微镜观察细胞的形态变化，流式细胞术（fcm）检测其凋亡率和细胞周期。结果①制备的pod-nlc扫描电镜下呈球形，有较好的稳定性，粒径为（85.6±10.25）nm，电位为（26.2±4.1）mv，包封率为（88.56±3.1）%；②pod-nlc能较强地抑制h8细胞的增殖，其抑制作用呈现时间和剂量依赖性；pod-nlc和pod作用72h对h8细胞的抑制率最高分别为95.8%、65.6%，半数抑制浓度（ic50）分别为0.015、0.13μg/ml；空白nlc对h8细胞的增殖无影响;③浓度为0.01μg/ml的pod-nlc和pod分别处理h8细胞48h后，h8细胞的凋亡率分别为（88.30±4.28）%和（59.95±3.26）%；荧光显微镜观察，均出现了核固缩、染色质高度凝聚、凋亡小体等典型的凋亡形态改变；与空白对照组相比，pod-nlc组和pod组g2/m期细胞比例明显增多，s期细胞比例无明显变化，g0/g1期细胞比例明显减少，但两组间细胞周期时相比例的差异无统计学意义（p>0.05）。结论该制备工艺可行；与pod相比，pod-nlc对h8细胞具有更强的增殖抑制和凋亡诱导效果，可使细胞阻滞于g2/m期，显示出良好的抗宫颈hpv感染的效果。