枯草芽孢杆菌生物素操纵元的初步改造

为了克服生物素生物合成中的抑制作用，提高生物素操纵元基因本底水平的表达，分别构建了整合表达载体pgjj01和pgjj02，通过双交叉整合的方式先后将线性化的pgjj01和pgjj02整合到枯草芽孢杆菌as1094的染色体上，构建了枯草芽孢杆菌gjz01，用强启动子p43-1替换掉生物素操纵元自身的启动子pbiotin，并在biob和bioi基因间加入强终止子和强启动子p43-2。经pcr和southern检测表明，整合构建正确。试验可为下一步研究生物素操纵元基因表达提供良好的宿主菌素材。