鲢igfb-1基因全长cdna的克隆及表达分析

【目的】克隆鲢胰岛素样生长因子结合蛋白1（igfbp-1）基因，分析其编码蛋白的结构与功能，并分析低氧胁迫下该基因在鲢肝脏中的表达情况。【方法】采用cdna末端快速扩增技术(rapidamplificationofcdnaends，race)扩增鲢igfbp-1基因的全长cdna，通过半定量rt-pcr法对鲢肌肉、心脏、脑、肾脏、肝脏、腮和脾等组织器官igfbp-1mrna的表达水平进行检测，利用real-timepcr法检测急性低氧胁迫0，2，4，6，8，10和12h后鲢肝脏组织中igfbp-1表达量的变化。【结果】鲢igfbp-1全长cdna为1081bp，具有73bp的5′非编码区(untranslatedregions，utr)、789bp的开放读码框(openreadingframe，orf)，以及219bp的3′utr，编码含262个氨基酸的蛋白质。rt-pcr结果表明，igfbp-1在肌肉、心脏、脑、肾脏、肝脏、腮和脾等7种组织中均有表达，其中在肝脏中的表达量最高，心脏和肌肉次之，在脑中的表达量最低；real-timepcr结果表明，在低氧胁迫6h时，igfbp-1cdna在肝脏中的表达量显著增高，随后略有降低但仍显著高于未进行低氧胁迫处理组。【结论】克隆得到鲢igfbp-1全长cdna，该基因在肝脏组织中大量表达；随着低氧胁迫时间的延长，鲢肝脏中igfbp-1mrna表达量升高，达最大值后继续低氧胁迫其表达量略有降低。