外源蛋白在苜蓿体细胞胚中的表达

【目的】探讨转基因苜蓿植株根、茎、叶和体细胞胚中外源gus的表达情况，为外源蛋白在苜蓿体细胞胚中的积累提供理论依据。【方法】以在加拿大广泛种植的n4.4.2紫花苜蓿品种的叶柄为外植体，进行农杆菌gv3101介导的苜蓿遗传转化，将感染的苜蓿叶柄外植体置于不同的转化培养基中培养，获得了适合于农杆菌介导的转基因苜蓿植株，将其用于转基因体细胞胚的诱导。采用pcr方法筛选阳性株系，并对其进行gus组织化学染色分析，对转基因植株根、茎、叶和体细胞胚进行荧光定量分析。【结果】以苜蓿叶柄为外植体成功获得11株阳性转基因植物，转化效率为30.6%。gus荧光定量分析结果表明，体细胞胚中gus外源蛋白的表达量明显高于根、茎和叶，是其表达量的3～6倍；根、茎和叶中gus表达量较低，且三者间没有明显差异。【结论】苜蓿体细胞胚能积累相对高的外源蛋白，是外源蛋白表达的最佳材料，为外源蛋白大量工厂化生产奠定了实验基础。