srb法检测鸡外周血t淋巴细胞增殖试验最佳条件的筛选

【目的】探讨磺酰罗丹明b法(sulforhodamineb,srb)检测鸡外周血t淋巴细胞增殖反应的最佳条件。【方法】体外培养鸡外周血t淋巴细胞，选用srb法对淋巴细胞含量(1×105，1×106，2.5×106，5×106，7.5×106和1×107ml-1)、cona质量浓度(5.0，7.5，10.0，12.5和15.0μg/ml)、培养时间(36，48，60h)3个因素进行组合设计培养t淋巴细胞，每个组合设3个重复，srb显色后用酶标仪在492nm波长处测量od492值，计算刺激指数(stimulationindex，si)，筛选srb法检测鸡外周血t淋巴细胞增殖的最佳条件。【结果】srb法检测鸡外周血t淋巴细胞增殖试验的最佳条件为：淋巴细胞含量1×106ml－1},cona质量浓度5.0μg/ml,培养时间48h。【结论】确定了体外培养鸡外周血t淋巴细胞增殖的最佳cona质量浓度、培养时间及淋巴细胞含量，证实用srb法检测鸡外周血t淋巴细胞增殖结果可靠，是切实可行的淋巴细胞数量与活性检测方法。