巨桉egrcbf3基因的克隆与逆境响应表达分析

【目的】克隆巨桉（eucalyptusgrandis）抗逆相关基因egrcbf3（genbank登录号：jq068829）的全长cdna序列，分析egrcbf3在低温、干旱、脱落酸（aba）处理和高盐条件下的表达。【方法】利用rtpcr结合race技术，克隆巨桉抗逆相关基因egrcbf3全长cdna序列；分析正常条件下，巨桉根、茎和叶中egrcbf3的表达情况；同时采用qrt-pcr，分析不同低温（0，2，4，6，8℃）和4℃处理不同时间（2，4，8，24和48h），以及干旱、aba和高盐等逆境条件下egrcbf3的响应表达情况。【结果】egrcbf3cdna全长1161bp，含有1个675bp的orf，编码224个氨基酸，包含1个ap2结构域。该基因编码的蛋白与蓝桉中的cbf蛋白同源性最高，达97%。egrcbf3在巨桉的叶、茎和根中均有表达，但表达量无明显差异。对不同低温和4℃不同处理时间条件下egrcbf3表达的qrt-pcr分析表明，egrcbf3基因受低温诱导，在2℃条件下诱导表达量最强；在4℃条件下随低温时间的延长，其诱导表达特性不变，仅略有波动。在100μmol/laba、200mmol/lnacl和干旱处理条件下，egrcbf3的表达不受aba和盐胁迫的影响，但在干旱胁迫下被诱导。【结论】egrcbf3响应低温胁迫诱导，同时可能也参与了干旱胁迫的逆境响应机制。