山羊表皮干细胞的分离培养及egfp基因转染研究

采用组织块法和酶消化法对山羊表皮干细胞进行分离，对分离的表皮干细胞进行了免疫组化染色鉴定，并对其进行了增强型绿色荧光蛋白（egfp）基因转染研究。结果表明，2种方法均能得到山羊表皮干细胞，其中组织块培养法简单易行，组织块可重复利用，但原代细胞脱出时间较长，平均为8d，且培养季节对细胞脱出时间、原代传代时间、传代数有显著影响；酶消化法周期短，8d左右即可传代，不同培养季节对细胞克隆形成时间、细胞传代时间和传代数无显著影响，但处理过程繁琐。egfp基因在转染表皮干细胞24h后大量表达，转染率达20％～30％，72h时转染强度最大，荧光可持续5周；转染使细胞增殖能力明显下降。