红景天甙体外诱导人肝癌qgy-7703细胞凋亡研究

【目的】探讨红景天甙(salidroside)体外诱导人肝癌qgy-7703细胞凋亡的作用及其可能的机制。【方法】-以体外培养的人肝癌qgy-7703细胞作为研究对象，采用四甲基偶氮唑盐（mtt）比色法检测红景天甙对qgy-7703细胞生长的抑制作用，采用吖啶橙/溴化乙啶(ao/eb)荧光双染、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞术，分析红景天甙对qgy-7703细胞凋亡的诱导作用；采用westernblot免疫印迹法探讨红景天甙诱导qgy-7703细胞凋亡的可能机制。【结果】-mtt比色法试验结果表明，0.01，0.1，1，10和100μg/ml红景天甙对qgy-7703细胞生长均有不同程度的抑制作用，细胞生长抑制率分别为13.2%，21.9%，31.4%，46.8%和60.9%，半数抑制质量浓度(ic50)为18.56μg/ml；用10μg/ml红景天甙处理qgy-7703细胞48h，ao/eb荧光双染后，可观察到个别qgy7703细胞呈现亮绿色或橘红色，表明细胞发生了凋亡；琼脂糖凝胶电泳结果显示，10μg/ml红景天甙作用qgy-7703细胞24，48和72h均可导致细胞核内dna产生有序断裂，形成dna梯形带；流式细胞术试验结果表明，10μg/ml红景天甙的加入量为100和200μl时，qgy-7703细胞凋亡数分别为178和331个，相应的凋亡率分别为1.8%和3.5%，阴性对照组（10μg/ml红景天甙加入量为0μl）凋亡细胞数为105个，凋亡率仅为1.1％；westernblot免疫印迹分析结果表明，红景天甙下调了bcl-2和pcna蛋白的表达量，而使凋亡活化基因bax与肿瘤抑制基因p53的蛋白表达量增高。【结论】红景天甙对体外培养的qgy-7703细胞具有明显的生长抑制作用和诱导凋亡作用，其诱导凋亡作用与bcl-2家族成员、p53、bax和pcna基因调控有关。