鸡传染性支气管炎病毒hn99株n基因的克隆与序列分析

根据genbank中已发表的鸡传染性支气管炎病毒(ibv)n基因序列,设计并合成1对特异性引物,用rt-pcr方法扩增ibvhn99株的n基因,并将其克隆入pmd18-t载体,转化感受态大肠杆菌top10,提取pmd18-t-n重组质粒,进行酶切和pcr鉴定,并对阳性质粒进行测序,将测序结果与h52,ark99,bj等参考毒株进行序列分析。结果表明,n基因全长为1230bp,编码1条409个氨基酸组成的多肽;其核苷酸与h52,ark99和bj等毒株的同源性为88.4%～90.7%,氨基酸同源性为91.7%～94.4%;hn99株与h52,ark99和bj等其他各毒株的亲缘关系均较远,是1株新的ibv变异株。