虹鳟脑型肌酸激酶基因cdna全长的克隆与序列分析

肌酸激酶(creatinekinase,ck)能够催化磷酸基团在二磷酸腺苷(adp)和磷酸肌酸间的可逆性转移,在细胞能量代谢过程中发挥重要作用.以虹鳟(oncorhynchusmykiss)为研究材料,使用rt-pcr和race法分离和克隆了虹鳟脑型肌酸激酶(ckb)基因cdna的全长序列(genbank登录号:fj548753).序列全长1493bp,其中5′端非翻译区81bp,3′端非翻译区266bp,开放性阅读框1146bp,编码381个氨基酸.虹鳟鱼ckb蛋白存在两个重要功能结构域,分别为ef-hand结构域和atp:guanido磷酸转移酶结构域.构建的系统进化树证实所克隆的肌酸激酶ck基因属于脑型肌酸激酶基因ckb.虹鳟鱼ckb蛋白序列与大西洋鲑(salmosalar)的ckb在进化树上最先聚为一支,这与两者同属鲑科鱼类这一事实是一致的.虹鳟鱼ckb蛋白序列与大西洋鲑的ckb蛋白同源性高达99%,与已报道的哺乳动物的ckb蛋白同源性均在80%以上相符,表明ckb基因在进化过程中是高度保守的,在细胞能量发生与转移过程中发挥着重要作用.