日本脑炎病毒c蛋白对其复制子载体自主复制活性的影响

为了研制具有高效自主复制能力的日本脑炎病毒(jev)复制子载体，验证其作为新型复制子疫苗载体的可能性。以保留全长核心蛋白c基因的jev复制子载体pctcjev为基础，通过pcr的方法减短c蛋白的部分基因序列，分别保留c23和c68位氨基酸，以lacz基因作为报告基因，构建了c基因长短不同的jev复制子载体pcmw-2m-1lacz、pcmw-2m-3lacz。将复制子载体转染表达jev结构蛋白的细胞系cme-4，通过lacz的表达检测jev复制子载体表达外源蛋白的能力，反映了jev的系列复制子载体的自主复制能力。结果保留c基因全长，c68、c23的复制子载体表达外源蛋白的能力相当，以上结果说明仅仅保留c蛋白的69个核苷酸即可保留jev复制子载体的自主复制能力，为进一步优化jev复制子载体，将该载体开发研制成为高效表达外源蛋白的疫苗载体提供了依据。