含par位点的重组质粒psjm3的构建及其稳定性研究

利用自然质粒psc101par位点的分离稳定性功能，构建了含par位点的质粒psjm4和psjm3，通过在同样宿主e.colihb101中的稳定性比较研究表明，不含par位点的重组质粒psj3很不稳定，e.colig3(psj3)在培养到第10代时已开始出现psj3的丢失，到培养至50代时则已全部丢失；而含par位点的重组质粒psjm3则表现得十分稳定，e.colig3-1(psjm3)经70代培养，仍无明显的质粒丢失现象，其稳定率保持97%以上。通过对不含par和含par的非重组质粒puc18和psjm4的稳定性比较也获得同样的结果。通过对e.colig3(psj3)和e.colig3-1(psjm3)的产酶活性比较研究表明，g3-1菌株明显高于g3菌株，说明我们构建的重组质粒psjm3上的par位点功能不仅没有因外源基因的表达而受影响，而且有利于外源基因的表达。