大肠杆菌色氨酸生物合成途径关键酶的调控

为了通过基因工程手段提高大肠杆菌色氨酸产量,对色氨酸生物合成途径中的关键基因trpr、tnaa、arog和trped进行了改造。首先通过敲除trpr基因解除了基因组上色氨酸合成和转运关键酶受到的反馈阻遏调控,进而又敲除了tnaa基因,阻断了色氨酸的分解代谢。然后,将色氨酸合成途径的关键酶arogfbr和trpedfbr基因串联表达,以去除色氨酸生物合成途径的瓶颈。与对照mg1655相比,trpr基因单敲菌色氨酸浓度提高了10倍,双敲菌色氨酸浓度提高了约20倍。pze12-trpedfbr转入双敲菌后色氨酸浓度提高到168mg/l,而将arogfbr和trpedfbr转入双敲菌后,色氨酸浓度提高到820mg/l。为构建色氨酸高产菌奠定了基础。