辽宁碱蓬甜菜碱醛脱氢酶基因（badh）启动子分离及序列分析

根据已知的辽宁碱蓬badhcdna5′端序列设计两个基因特异的反向引物（br1，br2），通过衔接头pcr获得了badh基因起始密码子上游265bp的序列。根据所获得的序列设计两个基因特异的反向引物（br3，br4），用br2、br3、br4分别与4个简并引物配对，通过tailpcr扩增，获得了约2kb的序列。经sequencer软件拼接上述两段序列，获得了badh基因起始密码子上游2055bp的序列。用tssptcm软件分析此序列，预测出转录起始点（t）位于起始密码子上游62bp处，由此获得了1993bp的slbadh启动子序列。用place软件分析此序列，发现该序列具有启动子的基本元件tatabox、caatbox，包含多个胁迫诱导元件，如盐诱导元件gaaaaa，抗冻、缺水、脱落酸、抗寒元件canntg，伤害诱导元件anattncnn，热激元件ataaatgt等，是一个强的胁迫诱导启动子。