在cho细胞中表达具有高效成骨活性的bmp-2/7异源二聚体

pcr扩增bmp-2与bmp-7的编码基因,利用重叠pcr以柔性肽(gly4ser)5编码序列将二者串连并克隆到质粒piresneo3上,转染cho-k1细胞得到混合稳定克隆。elisa检测培养液中bmp-2/7异源二聚体蛋白的表达水平为230.75±13.34ng/ml,以此为条件培养基处理成骨细胞株mc3t3,对照组为分别含有cho-k1细胞及大肠杆菌表达的bmp-2同源二聚体以及pbs的条件培养基。结果发现碱性磷酸酶染色与茜素红染色差异明显,定量rt-pcr显示分子指标oc、alp、runx2与osx的转录水平明显增高(p<0.05),luciferase报告基因检测bmp/smad通路活性较对照组升高明显(p<0.05)。首次设计构建了bmp-2/7异源二聚体蛋白,其成骨活性显著高于bmp-2同源二聚体。