pcr-mtdna技术鉴别检测不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分

以鸭肌肉组织dna为模板,利用pcr-mtdna技术成功克隆出了鸭mtdnacoiii基因(genbankaccessionno.dq655706)。对所克隆的序列分析表明,其序列包括鸭细胞色素c氧化酶iii(coiii)基因全序列784bp,通过同源性分析可知,动物的线粒体dnacoiii基因是相对保守的,利用此特性设计pcr-mtdna方法鉴别检测鸭源性成分的特异性引物;以各种动物肌肉组织及饲料dna为模板进行pcr扩增、经反复验证筛选出只能扩增出鸭dna的目的片段,而不能扩增出其他动物dna片段的特异性强、稳定性好的引物p3、p4;利用此引物pcr扩增鸭dna的特异性片段为226bp,对pcr产物进行测序分析可知与已克隆的鸭mtdnacoiii基因同源性达到100%,证明了所筛选引物的准确性。通过对不同含量的dna模板溶液进行pcr扩增的方法,对筛选出的特异性引物p3、p4进行灵敏度试验,结果分析表明灵敏度约为0.001%,证明该pcr方法具有特异性强、灵敏度高的特点,完全可作为鉴别不同动物肌肉组织和饲料中鸭源性成分的方法。