rapd技术在抗生素生物合成基因克隆表达中应用的研究

抗肿瘤抗生素c-1027具有极强抗肿瘤活性．其分子结构由一个酸性蛋白和脂溶性发色团构成，本文首次将rapd技术(随机扩增的多态性dna技术)运用于抗生素生物合成基因克隆表达研究。采用7种引物对5种c-1027无活性阻断变株总dna进行扩增．其中引物ga2扩增c-1027原株及阻断变株后，琼脂糖凝腔电泳结果表明，f2dna片段存在于原株而在变株af67中缺失，采用载体质粒pu459将该dna片段f2克隆至变铅青链霉菌．获得含重组质粒pif2的菌株no155。no155菌株和无括性阻断变株af67共培养后，发酵产物恢复了抗菌活性及抗瘤作用。sds-page及紫外光谱证实产物为c-1027。这表明f2dna片段古有编码c-1027生物合成的基因。