人白细胞介素12在昆虫细胞中的表达

人白细胞介素12(hil-12)是一种异源二聚体细胞因子，由p40和p35两个亚基通过二硫键连接而成。首先构建了两个表达载体pvl1392-hp40和pvl1393-hp35，并分别与线性化多角体病毒基因组dna共转染昆虫细胞株sf9，用目视法筛选出重组病毒acnpv-hp40和acnpv-hp35。利用pha激活的人淋巴细胞增殖试验，在条件培液中检测到重组hil-12的生物活性，表达量约为1.5～2μg/106细胞。经实时bia和northernblot分析，hp35和hp40两亚基在昆虫细胞中获得表达。非还原条件下的westernblot结果显示，重组hil-12的表观分子量为76kda，hp40同源二聚体的表观分子量为92kda。重组ph40具有明显抑制hil-12生物活性的作用。