用无血清培养基在填充床生物反应器生产rhuepo

在填充床生物反应器用含５％ｆｂｓ的ｄｍｅｍ：ｆ１２培养基培养产重组人促红细胞生成素（ｒｈｕｅｐｏ）的细胞ｃ２８～１０ｄ后，使用自制的无血清生产培养基（ｓｆｍｐ）生产ｒｈｕｅｐｏ。ｓｆｍｐ培养基既能维持细胞生长，又能生产ｅｐｏ，也便于纯化分离ｒｈｕｅｐｏ。使用填充床生物反应器培养细胞，能维持培养２０～２５ｄ，ｒｈｕｅｐｏ表达水平达１２～２８.４ｍｇ／ｌ之间，反应器的产率达到７１.０ｍｇ／ｌ／ｄ，比滚瓶的产率增加１２～１４倍。葡萄糖最高消耗量达到２１ｇ／ｌ／ｄ，细胞培养密度最高达到３.０×１０７／ｍｌ以上，每次可收无血清培养上清８０～８７ｌ。由于细胞被固定在聚酯片上，培养上清中脱落细胞很少。观察了反应器的乳酸和氨的含量，其结果表明乳酸和氨含量分别低于３.５ｇ／ｌ和５ｍｍｏｌ／ｌ，不影响产物的表达。经过多批培养和生长ｒｈｕｅｐｏ的结果表明，自行配制的ｓｆｍｐ培养基在该反应器能有效地维持细胞生长和生产ｒｈｕｅｐｏ。