巴西固氮螺菌yu62dratg基因启动子区域的核苷酸序列及其功能分析

对巴西固氮螺菌ｄｒａｔｇ上游区域进行了全序列分析，结果表明该区域除了编码部分ｎｉｆｈ基因外（ｎｉｆｈ与ｄｒａｔｇ转录方向相反），不编码任何其它已知的基因。但在该区域发现了一些可能的调控序列，它们包括上游激活序列（ｕａｓ）、下游启动子组份（ｄｐｅ）和富ａ＋ｔ区。这说明：ｎｉｆｈ与ｄｒａｔ间的区域可能主要起调控功能而非编码功能；ｄｒａ操纵元（ｏｐｅｒｏｎ）的启动子很可能是ｒｐｏｎ－依赖型。用ｐａｆ３００做载体，构建了ｄｒａｔ∷ｃａｍ转录融合质粒ｐａｔ１，并通过检测ｃｍｒ以检测ｄｒａｔ在大肠杆菌和巴西固氮螺菌中的表达，结果表明ｄｒａｔ在ｌｄ丰富培养基上，好氧条件下，只在巴西固氮螺菌中才表达。这说明，ｄｒａｔ的转录需要某种大肠杆菌中没有的因子，同时也表明ｄｒａｔｇ上游区域有启动子功能。利用启动子探针质粒载体ｐｃｂ１８２，构建了ｄｒａｔ∷ｌａｃｚ转录融合质粒ｐｃｔ１。在大肠杆菌中测定肺炎克氏杆菌ｎｉｆａ对ｄｒａｔ∷ｌａｃｚ的转录激活作用。结果表明ｎｉｆａ并不参与ｄｒａｔ的转录调控。