慢病毒载体感染成年食蟹猴骨髓间充质干细胞

骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells，mscs)具有增殖和多向分化潜能，临床应用广泛，近年来备受关注。另一方面，mscs易于转导和表达外源基因，是理想的基因工程细胞。非人灵长类(nhps)和人类具有非常相近的遗传背景，nhps模型在评价药物疗效和移植治疗等方面具有不可替代的价值。本研究采用密度梯度离心法分离成年食蟹猴骨髓单核细胞(marrowmononuclearcells，mncs)，贴壁培养mscs。同时构建表达绿色荧光蛋白(greenfluorescentprotein，gfp)的慢病毒载体，感染成年食蟹猴mscs。结果显示，体外培养的成年食蟹猴mscs均感染猴泡沫病毒(simianfoamyvirus，sfv)，体外培养成年食蟹猴mscs必须添加抗病毒药物tenofovir。但由于食蟹猴mscs感染sfv，以及培养中添加了抗病毒药物tenofovir，慢病毒载体的感染效率明显降低(＜10％)。本研究通过停用抗病毒药，在细胞复苏后6d转染慢病毒，可大幅提高慢病毒的感染效率(＞50％)。为成年食蟹猴mscs作为基因工程细胞应用于实验和临床研究提供了技术保证。