调节小鼠胰腺发育中ptf1a基因表达的micrornas的鉴定研究

ptf1a，又名p48，是ptf1转录因子的一个亚基，为胰腺命运决定与细胞分化必需的转录因子．最近研究发现，ptf1a表达的丰度变化与发育中胰腺细胞生长、分化和胰岛?茁细胞数量密切相关．然而，胰腺细胞中ptf1a的表达调节机制还不清楚．micrornas(mirnas)是一类约22nt的非编码小rna，它们通过切割靶mrna或抑制靶mrna的翻译调节基因的表达．一些研究提示，mirnas参与调控胰腺发育的多个过程．因而推测，mirnas可能在胰腺发育中参与调控ptf1a的表达变化．为了验证这一假设，结合两个靶基因预测算法的结果，获得4个可能调控ptf1a表达的mirnas．随后，利用双荧光素酶报告系统研究发现，预测得到mirnas中的mir-18a，mir-145和mir-495能通过结合到小鼠ptf1amrna的3′utr而有效抑制其表达．还利用qrt-pcr和免疫荧光染色实验研究了mir-18a、mir-145和mir-495与ptf1a在小鼠胰腺发育过程中的表达模式．结果表明，mir-18a，mir-145和mir-495与ptf1amrna及蛋白质的表达成负相关，进一步说明mir-18a,mir-145和mir-495可能在小鼠胰腺发育中调节ptf1a的表达．