a组轮状病毒多个结构蛋白抗原表位的串联表达及其免疫原性的检测

从北京腹泻婴儿粪便提取的轮状病毒(rotavirus，rv)(t114株)的rna中，克隆到轮状病毒结构蛋白基因vp4，vp6和vp7的全长cdna，对它们编码的蛋白质序列和可能的抗原表位肽进行了预测，选择了rv主要抗原蛋白vp7、vp6和vp4的4个抗原表位肽，通过人工合成dna的方式将这些抗原表位肽基因串联融合成一个阅读框rme(rotavirusmultipleepitopes,rme)并构建原核表达载体．大肠杆菌表达的rme在elisa反应中可被rv多克隆抗体识别，纯化的rme蛋白注射免疫小鼠可诱导特异性免疫应答，产生高滴度的同源氨基酸序列特异抗体和人rv抗体，其中针对rme的igg抗体滴度达到l∶40000，针对单个抗原表位ev7、ev6和ev4的igg抗体滴度达l∶10000～l∶20000，针对rvwa株的igg抗体滴度较低为l∶2500，但能特异地中和该病毒对mac145细胞的侵染．上述结果为新型rv基因工程疫苗的研发提供了论据和基础．