应用蛋白质组学技术筛选胃癌耐药相关蛋白质

胃癌多药耐药性是临床胃癌化疗失败最主要的原因之一，但其分子机制仍然不太清楚.为了寻找新的胃癌耐药相关的蛋白质，揭示胃癌多药耐药的分子机制，以胃癌细胞sgc7901和长春新碱诱导的耐药胃癌细胞sgc7901/vcr为研究对象，应用二维凝胶电泳(two-dimensionalelectrophoresis，2-de)技术分离两种细胞的总蛋白质，图像分析识别差异表达的蛋白质点，基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry，maldi-tof-ms)及电喷雾电离串联质谱(electrosprayionizationtandemmassspectrometry，esi-q-tof)对差异表达的蛋白质点进行鉴定，蛋白质印迹和实时rt-pcr验证部分差异蛋白质在两株细胞中的表达水平，反义核酸转染技术分析hsp27(heatshockprotein27，hsp27)高表达与sgc7901/vcr耐药的相关性.得到了分辨率较高、重复性较好的两株细胞系的二维凝胶电泳图谱，质谱分析共鉴定了24个差异蛋白质点，蛋白质印迹和实时rt-pcr验证了部分差异蛋白的表达水平，反义寡核苷酸抑制hsp27表达能增加sgc7901/vcr对长春新碱的敏感性.研究结果不仅提示这些差异蛋白质如hsp27，sorcin等可能与胃癌的多药耐药相关，而且为揭示胃癌细胞的多药耐药性产生机制提供了线索.