tet调控stgc3基因表达cne2细胞系的建立及其功能初步研究

利用tet-on调控系统，建立受强力霉素诱导stgc3基因表达的cne2细胞系，为进一步研究stgc3的功能提供了一个理想的实验平台.先后将调控质粒ptet-on和反应质粒ptre-stgc3转染入cne2细胞，并用g418和潮霉素分别进行两轮筛选，运用rt-pcr选择对强力霉素诱导敏感的细胞克隆.用不同浓度强力霉素诱导cne2/tet/ptre-stgc3细胞，rt-pcr检测stgc3的表达，确定强力霉素的最佳诱导浓度.采用此浓度的强力霉素分别诱导cne2、cne2/tet/ptre、cne2/tet/ptre-stgc3三组细胞，测定细胞的生长曲线、克隆形成率和细胞周期分布.诱导stgc3基因高表达，cne2细胞增殖速度显著减慢(p<0.05)，克隆形成能力显著降低(p<0.01)；流式细胞仪检测结果显示，瘤细胞群体中处于g0/g1期细胞数增加，细胞阻滞于g0/g1期.tet调控stgc3基因表达cne2细胞系的成功建立，为进一步研究stgc3基因的功能提供一个理想的细胞模型.