糖尿病大鼠脑细胞周期依赖性蛋白激酶5和蛋白激酶a参与调节tau蛋白磷酸化

细胞周期依赖性蛋白激酶5(cyclin-dependentkinase5,cdk-5)及蛋白激酶a(proteinkinasea，pka)是调节tau蛋白磷酸化的重要激酶，其对糖尿病(diabetesmellitus,dm)大鼠脑内tau蛋白磷酸化的作用如何，目前尚不明确．为探讨胰岛素缺乏的dm大鼠海马cdk-5及pka对tau蛋白磷酸化的作用,用链脲佐菌素(streptozotocin，stz)建立dm大鼠模型，fura-2负载及荧光测定细胞内游离ca2+浓度,免疫沉淀法测定cdk-5活性,放射性配体结合实验检测pka的活性，蛋白质印迹检测tau蛋白磷酸化的水平．结果提示：在dm大鼠海马神经元,ca2+浓度升高，cdk-5及pka活性升高，tau蛋白在ser198/ser199/ser202和ser396/ser404位点的磷酸化增强．cdk-5的特异性抑制剂roscovitine可降低dm大鼠cdk-5活性，但不能降低pka活性，使tau蛋白在ser198/ser199/ser202位点磷酸化水平降低，但不降低ser396/ser404位点的磷酸化，roscovitine处理正常大鼠后，上述酶的活性及tau蛋白的磷酸化无明显变化．首次从整体水平上证实dm大鼠海马cdk-5及pka活性升高，协同促进tau蛋白在ser198/ser199/ser202位点和ser396/ser404位点的磷酸化，神经元内游离ca2+浓度升高可能起重要作用．