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水产学报 2009
哲罗鱼免疫球蛋白轻链可变区序列及其多样性DOI: 10.3724/SP.J.00001, PP. 996-1002 Abstract: 采用rt-pcr技术从哲罗鱼主要免疫器官脾脏总rna中获得免疫球蛋白(immunoglobulin,ig)轻链可变区cdna克隆,随机挑取51个阳性克隆菌落进行测序,得到46条完整的不重复序列,用以确定哲罗鱼igl的家族种类,为哲罗鱼病毒性疾病的疫苗研制提供理论依据。经过blust网络对比,结果显示:其与genbank报导的虹鳟(序列号为x68517.1和x68519.1)序列的相似性均达90%以上,46条序列的核苷酸相同率分别为最低86.1%(p4与p43)至最高的99.8%(p21与p38)之间不等;经dnastar5.0软件包megaling中jotunhein方法对所得序列进行氨基酸同源性比较,得到两个不同的家族;通过可变性参数计算方法可知哲罗鱼igl的可变性主要集中在cdrs区,可变性最高的区域为cdr3区;对可变区中cdr3序列进行分析后,得出哲罗鱼ig轻链可变区的重排方式是jκ基因片段位于vκ基因片段的3′端的结论,这种重排方式增加了核苷酸不同的连接方式,使哲罗鱼抗体具有更多的可变性空间;对照其亲水性分布图可知:可变区的亲水性氨基酸主要分布于lp前端,fr1末端,完整的fr2,fr3两端,以及cdr1,cdr2和cdr3前端。
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