大口黑鲈病毒性溃疡病病原的分离和鉴定

对广东省佛山地区2008年夏季高温时期暴发的大口黑鲈溃疡病的病原进行分离，从患病鱼的病灶肌肉组织中分离到5株嗜水气单胞菌,人工感染健康大口黑鲈，均未出现溃疡暴发病的典型症状病鱼体表大片溃烂，裸露肌肉坏死并有出血，尾鳍、胸鳍和背鳍基部红肿溃烂。制备病灶肌肉组织的除菌过滤液，背部肌肉注射感染健康大口黑鲈，7d后出现典型的溃疡病症状。取自然发病鱼和人工感染的患病鱼病灶肌肉组织制作超薄切片，经电镜观察，均发现组织中有大量病毒颗粒，病毒粒子有囊膜，呈六角形，为正20面体对称结构，大小约为145.5nm。根据已知虹彩病毒主要衣壳蛋白（mcp）基因序列设计特异引物，提取人工感染发病鱼病灶肌肉组织的dna进行pcr扩增，将扩增片段进行序列测定与分析，结果表明该序列与已报道的虹彩病毒mcp基因有着较高同源性（39.5％～100％）。从电镜观察和mcp基因测序分析结果确认该病毒为虹彩病毒科蛙病毒属中的一种病毒，与国外报道的大口黑鲈病毒（lmbv）在分子特性和引起的疾病特征上有一定差异。研究结果表明引起大口黑鲈溃疡性暴发病的病原是虹彩病毒，将该病暂命名为大口黑鲈病毒性溃疡病。